|
|||||||||||||||||||||||||||
在緩沖液中Tris-HCl與HEPES都是應用比較普遍的。為什么把它們兩個拿出來對比，這也是為了很好的讓大家了解到更多相關信息，以便在采購和使用過程中更準確。
1、Tris-HCl緩沖液
Tris緩沖液是在生物化學研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍，Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0～9.0。
1）Tris-HCl緩沖液優(yōu)點
堿性較強，可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖液；對生物化學過程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。
2）Tris-HCl緩沖液缺點
pH受濃度影響較大，稀釋10倍，pH變化大于0.1
溫度效應大，如4℃時pH=8.4，37℃時pH=7.4
2、HEPES緩沖液
HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。
1）HEPES緩沖液優(yōu)點：
在開放式培養(yǎng)或Cells觀察時能維持較恒定的pH值，并對Cells傷害性作用。
2）HEPES緩沖液缺點：
在高濃度時對一些Cells可能有毒，與其他緩沖劑相比價格略貴。
Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的應用
1、Tris-HCl緩沖液
Tris是蛋白質電泳緩沖液的主要成分之一，其在電泳緩沖液中與甘氨酸構成緩沖體系，穩(wěn)定電泳過程中的PH。此外，Tris還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標準物。作為蛋白緩沖液時，若后續(xù)工作需要質譜，則不適宜用Tris，換成其他質譜儀可耐受的緩沖液。
2、HEPES緩沖液
HEPES緩沖液對Cells傷害性作用，它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用時濃度為10-50mmol/L，一般培養(yǎng)液內含20mmol/LHEPES即可達到緩沖能力。它還用于環(huán)境，分析和生物學研究；作為陽離子交換層析中的結合緩沖液和洗脫液；作為凝膠電泳中的運行緩沖液等。
