近期了解到有實驗人員反應(yīng)，作WB實驗有失敗的情況，懷疑與實驗中使用的緩沖劑有關(guān)，可能是緩沖劑未滅菌或配制成溶液后感染了細菌導(dǎo)致的。那么WB實驗的失敗是否真的與緩沖劑染菌造成的呢？

WB實驗即western blot蛋白質(zhì)印跡實驗，或稱為免疫印跡實驗，是將電泳分離后的細胞或組織中蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術(shù)。WB實驗失敗的原因有很多，緩沖劑只是其中一個影響因素。

緩沖劑長菌對WB實驗影響

WB實驗通常是不要求在無菌條件下操作的，因為本實驗基本不會受到影響。基本可以確定，WB實驗的失敗不會是因為緩沖劑染菌導(dǎo)致，是其它原因。緩沖劑里即使有殘留的細菌，其含有的蛋白質(zhì)量是極少的，如果對實驗產(chǎn)生影響，那么緩沖劑肯定早已經(jīng)嚴重變質(zhì)了，會直接注意到而不會使用。緩沖劑在發(fā)生這么嚴重的污染之前應(yīng)該早就用完了。

緩沖劑離子強度對WB實驗影響

緩沖劑未滅菌雖然對WB實驗不會造成影響，不過其離子強度不合適有可能會造成WB實驗失敗。實驗中通常是采用Tris作為緩沖劑，它有著較低的離子強度，不過在電泳過程中，通常會增加氯化鈉，以提高離子強度加快電泳速率。而離子強度過高的話可能造對蛋白質(zhì)造成影響，使WB實驗失敗。另外也要控制好緩沖劑pH值，這對WB實驗至關(guān)重要。

所以說緩沖劑未滅菌或染菌與WB實驗失敗關(guān)系不大，更應(yīng)該考慮緩沖劑的離子強度、pH值是否合適或者樣品制備等問題。德晟是生物緩沖劑原料，可大量提供Tris、CAPS、MOPS等緩沖劑原料。