DyLight™系列熒 光標記是一種近年來被廣泛應用的新型熒光染料，由于具有很好的光譜寬度、更強的熒光強度，更高的光學耐受性(抗淬滅性)、對pH不敏感、分子較小而滲透性更好的優(yōu)勢，越來越受到科研客戶的喜愛。DyLight™種類齊全，如Dylight 405是藍色熒光，替代Alexa 405；DyLight 549是綠色熒光，可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488；完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549；替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594；Dylight 633和Dylight 649(可替代Cy5/Alexa 647)則是更強的紅色熒光；另外，Dylight還有適配Odyssey系統(tǒng)的近紅外和遠紅外二抗Dylight 680和DyLight 800。下面我們來看看DyLight系列熒光的優(yōu)異表現(xiàn)吧：

 DyLight 488標記的抗體比Cy2 和FITC標記的更亮，與Alexa Fluor 488 標記的亮度相當。DyLight 549標記的抗體比傳統(tǒng)的羅丹明、TRITC等熒光亮，與Cy3 和Alexa Fluor 555亮度相當；而DyLight 594標記的抗體熒光亮度明顯強于Alexa 594標記抗體。相比較Texas Red而言，不僅更亮，而且具有更好的水溶性。

左上圖為使用 FACSCalibur流式細胞儀(Becton Dickinson)，分析抗-CD3和其他熒光素標記的人外周血淋巴細胞圖譜。不同顏色分別指示DyLight 488 (綠色)、FITC (黃色)、Cy2 (藍色)以及Alexa Fluor 488(紅色)標記的熒光二抗。箭頭所指處顯示Alexa Fluor 488在這個實驗中有輕微的背景。右上圖為在流式分析中，以抗-CD3和各種熒光素連接二抗標記的人外周血淋巴細胞圖譜。綠色為DyLight 649、黃色為APC、藍色為Cy5 標記的二抗。Alexa Fluor 647為紅色區(qū)域。箭頭所指處顯示Alexa Fluor 647在這個實驗中有輕微的背景。

三、DyLight熒光二抗種類更多更全

從藍色的DyLight 405、綠色的DyLight 488、黃色的DyLight 549、橙色的DyLight 594到紅色的DyLight 633和DyLight 649等最常用的熒光顏色，激發(fā)光和發(fā)射光光譜分布合理，適用于各種熒光分析。其中藍色熒光的DyLight 405適合用于綠色和紅色以外的三標實驗。

另外，還有兩種遠紅外DyLight標記抗體，具有更低的熒光背景干擾和更強的樣本穿透力，因而更適用于細胞或組織的成像等領域的研究。艾美捷提供的進口DyLight抗體產(chǎn)品覆蓋各種動物種屬，包括人、小鼠、兔、大鼠等，另有3種標記的鏈親和素。

四、DyLight熒光二抗具有最高的性價比！

 可能還需要考慮的一個問題是價格的問題，其實Dylight的熒光二抗與常規(guī)熒光二抗相比，具有更高的性價比，一般來說，Dylight的價格比常規(guī)二抗只高20%左右，但是Dylight的效價通常是常規(guī)熒光二抗的2-4倍左右，因此就最終的性價比，Dylight更勝一籌。舉例來說，EarthOx的 FITC標記的山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E031210)，100μl是￥160；而相應的EarthOx的Dylight 488標記的山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E032210)，100μl報價是￥240，但是在具體使用時，比如免疫熒光實驗，其推薦稀釋比率分別為 1:100和1:400，即100μl的FITC標記山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E031210)最終使用液是10ml，而100μl的Dylight 488標記山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E032210)最終使用液是40ml，可見，即使不考慮Dylight更高的熒光強度、更好的光學穩(wěn)定性和特異性，但就價格來說，Dylight熒光二抗也具有更高的性價比。

從光穩(wěn)定性上來說，DyLight 488與Alexa 488均表現(xiàn)優(yōu)異，均強于FITC和Cy2；DyLight 549與Alexa 555具有相當?shù)哪凸庑裕晕⒈菴y3強。在封片劑中加入抗淬滅劑如ProLong Gold、VECTASHIELD或含N-propyl gallate的PBS-甘油等可增加這三種熒光染料的耐光性；在可見光譜的橙-紅區(qū)域內(nèi)，DyLight 549和Cy3標記的二抗在所有免疫熒光實驗中表現(xiàn)出最大靈敏度。DyLight 594在不含有抗淬滅劑的條件下，遠較Texas Red穩(wěn)定，與Alexa594相當；在含有某些抗淬滅劑的情況下，DyLight 594同樣表現(xiàn)優(yōu)異。

我們向您推薦美國EarthOx原裝進口的液體形式的小包裝常用DyLight系列二抗產(chǎn)品，以及Jackson各種規(guī)格的全系列DyLight二抗產(chǎn)品。

小包裝EarthOx的DyLight熒光二抗。均提供100μl和500μl兩種包裝現(xiàn)貨產(chǎn)品。EarthOx是美國專業(yè)生產(chǎn)免疫試劑并提供細胞學研究解決方案的公司，其產(chǎn)品主要銷往到全球的的大學、科研院所等研究機構。其中EarthOx為您提供 最常用的DyLight 549熒光標記二抗產(chǎn)品：

大包裝DyLight二抗更劃算、種類更多！

1. 大包裝二抗種類更齊全、應用更廣泛。更重要的是，Jackson的DyLight系列種類非常多，幾乎能滿足實驗的各種需求，包括經(jīng)過各種血清吸附、不同種屬來源(包括驢、兔、山羊、小鼠等)、F(ab’)2和Fab等不同片段化，以及特異性抗IgM/IgA或者抗Fab或Fc等二抗產(chǎn)品。下列為部分DyLight二抗列表，更多相關產(chǎn)品及解決方案請聯(lián)系艾美捷科技有限公司。

 2大包裝二抗具有更高的性價比。以DyLight 488山羊抗小鼠二抗為例，Jackson的(貨號為115-485-003)規(guī)格為2mg，可配制成1.3ml，與EarthOx的相應二抗相比，是其100μl包裝價格的6倍，含量卻增加了12倍！另外，由于DyLight熒光二抗本身分子量較小，同一個二抗分子上可以標記更多的DyLight熒光物，比如與相同規(guī)格的FITC山羊抗小鼠二抗(貨號為115-095-003)相比，價格雖然增加了25%，效價卻高了100%！這還沒有考慮DyLight具有更好的抗萃滅性、靈敏度以及信噪比！

*標有“(min X…Prot)” 字樣的抗體是經(jīng)過了圓括號中所標的物種的IgG和/或血清蛋白的吸附處理的二抗。與一個物種反應的二抗可能與其他物種發(fā)生交叉反應，除非這類抗體經(jīng)過其他物種的吸收實驗。而經(jīng)過了相關物種的血清蛋白吸附便可以降低與該物種的IgG的非特異性結合能力。但是需要注意的是，這種經(jīng)過針對物種吸附處理的抗體識別相近物種單抗的表位數(shù)量也減小了，其識別單抗的能力也很弱。

# 這種F(ab’)2片段形式的二抗是用胃蛋白酶消化IgG去除Fc部分，剩下兩個靠二硫鍵連接的結合抗原的Fab部分，依然是二價的；該抗體可避免與Protein A /G或與Fc受體的結合， 還由于其分子本身比較好，更容易滲透入細胞組織結構內(nèi)而靈敏度更高 。